试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
1 pg/mL - 32 pg/mL
使用目的：
本试剂盒用于测定鸡血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中白细胞介素6（IL-6）的含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡白细胞介素6（IL-6）水平。用纯化的鸡白细胞介素6（IL-6）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入鸡白细胞介素6（IL-6），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡白细胞介素6（IL-6）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡白细胞介素6（IL-6）含量。
试剂盒组成：
|
试剂盒组成
|
48孔配置
|
96孔配置
|
保存
|
|
说明书
|
1份
|
1份
|
|
|
封板膜
|
2片
|
2片
|
|
|
密封袋
|
1个
|
1个
|
|
|
酶标包被板
|
1×48
|
1×96
|
2-8℃保存
|
|
标准品
|
-
×6管
-
×6管
|
|
2-8℃保存
|
|
酶标试剂
|
5 ml×1瓶
|
10 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
样品稀释液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
显色剂A液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
显色剂B液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
终止液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
20×浓缩洗涤液
|
15ml×1瓶
|
25ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
注：标准品浓度依次为：32、16、8、4、2、0 pg/mL.
样本处理及要求：
-
血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
-
血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
-
尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
-
细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
-
组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
-
标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
-
不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
-
标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。
-
加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
-
加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。
-
温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
-
配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
-
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
-
显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
-
终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
-
测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
计算：
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，
在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释
倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值
代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释
倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项：
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
-
如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
1、产品收到了，质量很好，与卖家描述的一样，很喜欢，卖家服务态度很好，很满意！！！
2、很实惠，与卖家描述的一样，商家服务态度好，物流快，这次的购物非常满意。
3、宝贝收到了，质量也不错 与店主描述一致！
4、物流很及时，质量也很好，正品！
5、产品看起来挺好的，很喜欢，好评！
6、果然是一分价钱一分货啊！店家包装仔细认真！客服服务也很到位！
7、产品收到了，质量很好，非常喜欢，包装很好，满意！
8、产品收到了，质量不错，卖家服务非常周到，好评！
9、物流很快，东西很好，谢谢！
10、商品挺好的，跟想象的一样！
11、卖家服务不错，快递也很快，质量不错，很喜欢 有需要下次还来购买！
12、高大上 质量很好 我很喜欢 要赞！
13、宝贝已收到，质量不错。看到的人都说买的很划算，老板非常热情，服务态度非常好，超级给力!
14、宝贝收到了。非常的好，高端大气上档次！包装特别精美！
15、后勤服务好，质量与阐述的一样，我很喜欢，发货速度又快，值得好评!
16、很不错，质量杠杠滴，卖家好好，好喜欢这样的服务态度呢，物流也很给力!
17、果然是物有所值，期待效果！店家包装仔细认真！客服服务也很到位！特别感谢店家送的小赠品！必须好评！
18、挺好的也非常满意，性价比还是不错的。卖家很给力，赞！
19、东西收到了，完好无损，满意！
20、店家很讲信誉，而且很不错哦，在这家店买东东，我很满意~
一、 贵司能否开13%增值税发票?公司开票信息如何提交给贵司?
您好！可以的，建议您下单时选择，如您是第一次开具增票，还请您将营业执照副本复印件、一般纳税人资格证书复印件、税务登记证书副本复印件、开户行证明复印件传真及加盖公章的开票信息至我司4000-933-930，并注明订单号，以便我司为您开具，为您带来不便，感谢您对易利生物的支持！祝您购物愉快！
二、我需要的产品比较多，请问贵司网站上的产品都有货吗？什么时候能发货？
很多经销商都在我们家拿的，我们所销售的产品都是充足的，请放心选购！买家付款完毕之后，无特殊情况下当日16点前的订单都可以发出（如遇特殊情况，如天气、爆仓等不可控因素，我们则会在72小时内发货）我们的发货人员会认真严格地按照流程发货，这是为了保证客户能够以预定的时间收到所需产品，也为了保证我们的服务更加完善，得到顾客们的满意！
三、在贵司的网站上经常能看到有一些促销产品，价格确实比别家的便宜不少，很是心动，只是担心这些产品是不是有什么质量问题呢?
您好！这些产品并不是质量差卖不出的产品哦！为了回馈广大新老顾客对我公司长期以来的支持，我公司会定期地发布一些优惠产品，请及时关注！我们是跑量，赚信誉的，如果您发现任何质量问题都可以退货的，请放心选购！
四、我们的实验室在呼和浩特，请问贵司的销售网点能到达吗？
可以的，我们的销售地遍布全国各地，详情可拨打我们的4000-933-930免费电话或者在线咨询我们的客服人员！
五、我买的商品发货后多久能到？运输安全吗？
江浙沪地区一般无特殊情况下，2-3天的时间，其他地区一般5-7天，新疆西藏时效不保。具体还要以到货时间为准哦！
我们的产品非常牢固。但是运输途中难免会遇到磕碰，这也是我们不能百分之百保证的，但是顾客在签收时有任何问题，我们都会第一时间为顾客解决的。
上海丹施生物经过不断的实验优化和改进，积累了很多的经验，拥有专业的丹施生物研发团队。利用专业的免疫技术自主研发的elisa试剂盒，能对血清及其它样本定量检测抗原，定性检测特异性抗体。优质的试剂，先进的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA检测的方便性、稳定性、重复性和可靠性方面都具有很大的优势。
ELISA检测技术服务内容：
1、双抗体夹心法检测抗原
2、间接法检测抗体
3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。
二、样本要求
在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书，具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。
液体类标本：标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
血浆：应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10%（v/v）抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin
或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
尿液、胸腹水、脑脊液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.0-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
三、寄标本时需注明以下情况：
1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；3、联系方式；4、实验后标本是否寄回。
客户须知：
客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
